噻呋酰胺人工抗原的合成及酶联免疫吸附分析方法的建立
以化合物2鄄甲基鄄4鄄三氟甲基鄄5鄄噻唑甲酸(MTCA)为噻呋酰胺的半抗原合成人工抗原,采用活泼酯法合成免疫原MTCA鄄BSA,分别采用活泼酯法、混合酸酐法和N,N'鄄羰基二咪唑/4鄄二甲氨基吡啶(CDI/DMAP)法合成3种包被原MTCA鄄OVA鄄1、MTCA鄄OVA鄄2和MTCA鄄OVA鄄3。免疫动物后,最终以包被原MTCA鄄OVA鄄3筛选并获得了具有高特异性的噻呋酰胺多克隆抗体,建立了检测噻呋酰胺的间接竞争酶联免疫吸附(ic鄄ELISA)分析方法。本方法线性检测范围为0.08~10.00mg/L,半数抑制浓度(IC50)为1.39mg/L,检出限为0.08mg/L,对自来水、湖水和小麦中的噻呋酰胺添加回收率在72.0%~128.3%之间,检测结果与HPLC法具有良好的相关性(R2=0.9994)。本研究建立的ic鄄ELISA方法可用于环境水样与小麦等农产品中噻呋酰胺残留的快速检测。
噻呋酰胺; 人工抗原; 酶联免疫吸附分析; 多克隆抗体; ThifluZamide; 噻呋酰胺; 人工抗原; Polyclonal antibody; Artificial antigen; EnZyme linked immunosorbent assay; 酶联免疫吸附分析; 多克隆抗体